Bourgouin, Jean-Philippe
(2020).
« Stratégie de marquage isotopique de la membrane lipidique de bactéries et de microalgues pour la résonance magnétique nucléaire du deutérium de l'état solide in cellulo » Mémoire.
Montréal (Québec, Canada), Université du Québec à Montréal, Maîtrise en chimie.
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Résumé
Bien qu'étroite, la membrane cellulaire exerce une lourde tâche dans le maintien de l'homéostasie. Elle doit ajuster un niveau favorable de perméabilité entre les molécules bénéfiques ou toxiques tout en s'adaptant aux changements physiques et chimiques de son environnement. L'équipe de recherche de la Pre Marcotte est l'un des rares
laboratoires à travers le monde à s'être spécialisé dans l'étude des membranes des microorganismes au sein de leur complexité cellulaire par la résonance magnétique nucléaire de l'état solide (RMN-ÉS). C'est la seule technique qui permette d'étudier la dynamique au niveau moléculaire des membranes des microorganismes dans leur état natif. Elle permet de prendre en compte la membrane dans l'organisme entier (in cellulo), voire vivant (in vivo). Ce type d'analyse permet l'émergence d'un nouvel outil diagnostique de la santé membranaire qui est corrélée à la santé cellulaire. Pour ce faire, il convient d'abord de mettre au point le marquage des lipides de ces microorganismes
avec des isotopes stables et sensibles pour la RMN. Plusieurs précurseurs marqués peuvent être utilisés: eau, sucres, acides gras, lipides exogènes ( disponibles commercialement) ou, et c'est la nouveauté de cette étude, avec des lipides endogènes synthétisés par le microorganisme en question. Il faudra alors optimiser les paramètres de culture ainsi que la concentration d'acides gras ou de lipides à utiliser. Si l'on arrive à obtenir un marquage des membranes sélectif aux lipides, l'interprétation du signal de la RMN est plus simple. Dans le cas de la RMN du deutérium, les lipides deutérés permettront de sonder les mouvements moléculaires. Cette stratégie sera employée pour étudier la membrane de microorganismes procaryotes (Escherichia coli) et eucaryotes (Chlamydomonas reinhardtii). Le taux de marquage et le profil d'acides gras seront déterminés par chromatographie en phase gazeuse couplée à la spectrométrie de masse (GC-MS), ce qui permettra d'évaluer l'influence du marquage sur les espèces étudiées. La pertinence d'utiliser des lipides endogènes qui respectent l'intégrité du profil d'acides gras des microorganismes sera également discutée.
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MOTS-CLÉS DE L’AUTEUR : membrane, marquage endogène, RMN-2H, GC-MS
| Type: |
Mémoire accepté
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| Informations complémentaires: |
Le mémoire a été numérisé tel que transmis par l'auteur. |
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Directeur de thèse: |
Marcotte, Isabelle |
| Mots-clés ou Sujets: |
Membranes lipidiques / Lipides / Radiomarquage / Résonance magnétique nucléaire / Escherichia coli / Chlamydomonas reinhardtii |
| Unité d'appartenance: |
Faculté des sciences > Département de chimie |
| Déposé par: |
Service des bibliothèques
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| Date de dépôt: |
08 oct. 2021 12:38 |
| Dernière modification: |
08 oct. 2021 12:40 |
| Adresse URL : |
http://archipel.uqam.ca/id/eprint/14697 |
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