Mireault, Myriam (2024). « Analyse métabolomique par spectrométrie de masse à haute résolution de fluides biologiques dans les études de population et d'hépatotoxicité » Thèse. Montréal (Québec), Université du Québec à Montréal, Doctorat en biochimie.
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Résumé
La métabolomique est une science omique pour laquelle l’intérêt n’a cessé de croitre depuis le début des années 2000. Elle vise à analyser qualitativement et quantitativement les métabolites présents dans un échantillon biologique. L’utilisation du sang et de l’urine présente de nombreux avantages pour la métabolomique, notamment une grande diversité de métabolites et une bonne accessibilité. L’étude de profils métaboliques peut aider à mieux comprendre les perturbations biologiques issues de l’environnement, de l’alimentation et de maladies. Dans cette thèse, une étude métabolomique de population a été effectuée en collaboration avec le consortium Human Personalized Omics Profiling afin d’obtenir une meilleure compréhension des variations naturelles des métabolites dans la santé humaine et d’identifier de nouveaux biomarqueurs d’exposition. Une analyse non ciblée a été réalisée sur 129 échantillons de plasma et 264 échantillons d’urine pour mesurer les différences de profils métaboliques en fonction du sexe, de l’âge, de l’origine ethnique, de l’indice de masse corporelle et la glycémie à jeun. Cette étude a permis d'identifier les voies métaboliques influencées par différents facteurs physiologiques. Les analyses de corrélation ont également mis en évidence des voies métaboliques moins connues. Au préalable, une méthode LC-HRMS/MS, incluant la préparation d’échantillons, la séparation chromatographique et l’acquisition des spectres MS/MS, a été développée pour l’analyse non ciblée de population afin de couvrir un large spectre de métabolites urinaires et plasmatiques. Cette méthode a permis d’identifier 243 et 426 métabolites plasmiques en mode négatif et positif respectivement, ainsi que 315 et 712 métabolites urinaires lors d’une acquisition en mode négatif et positif, respectivement. Une étude d'hépatotoxicité a également été réalisée afin d’étudier l’impact de l’acétaminophène (APAP) sur le profil d’acides biliaires. Lors d’une prise excessive, l’APAP peut causer des lésions hépatiques par la formation de son métabolite actif, le NAPQI, et affecter la synthèse et le métabolisme des acides biliaires. Une analyse semi-ciblée a permis de détecter 102 acides biliaires (attribution confirmée ou supposée) dans le plasma de rats traités à différentes doses d’APAP, dont 45 augmentaient significativement en fonction de la dose d’APAP. Chez l’humain, 275 acides biliaires ont été mesurés dans des échantillons de sérum, dont 249 ont augmenté significativement en comparant des volontaires sains avec des patients atteints d’une lésion hépatique d'origine médicamenteuse due à l'APAP. En séparant la population de patients selon la gravité clinique, onze acides biliaires ont été modifiés de manière significative en fonction de l'état des patients, y compris de multiples espèces sulfatées. Plusieurs acides biliaires d'intérêt identifiés de manière putative ont par la suite été caractérisés de manière plus approfondie à l'aide d'incubations in vitro. Cette étude a permis une analyse détaillée des perturbations du métabolisme complexe des acides biliaires impliqué dans l’hépatotoxicité. _____________________________________________________________________________ MOTS-CLÉS DE L’AUTEUR : métabolomique, étude épidémiologique, chromatographie liquide, spectrométrie de masse à haute résolution, hépatotoxicité
| Type: | Thèse ou essai doctoral accepté |
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| Informations complémentaires: | Fichier numérique reçu et enrichi en format PDF/A. |
| Directeur de thèse: | Sleno, Lekha |
| Mots-clés ou Sujets: | Métabolomique / Études épidémiologiques / Métabolites / Plasma / Urine / Hépatotoxicité / Acétaminophène / Acides biliaires / Chromatographie en phase liquide / Spectrométrie de masse |
| Unité d'appartenance: | Faculté des sciences > Département de chimie Faculté des sciences > Département des sciences biologiques |
| Déposé par: | Service des bibliothèques |
| Date de dépôt: | 03 sept. 2024 10:19 |
| Dernière modification: | 03 sept. 2024 10:19 |
| Adresse URL : | http://archipel.uqam.ca/id/eprint/17979 |
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