Compréhension et généralisation du mécanisme de protection de peptides hormonaux par conjugaison à l'albumine

Parisien, Michèle (2007). « Compréhension et généralisation du mécanisme de protection de peptides hormonaux par conjugaison à l'albumine » Thèse. Montréal (Québec, Canada), Université du Québec à Montréal, Doctorat en biochimie.

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Résumé

Le glucagon-like peptide 1 (GLP-1) et surtout l'exendin-4 sont de puissantes hormones insulinotropiques dépendantes du glucose dont le potentiel pourrait être grandement exploité dans le traitement des personnes atteintes du diabète de type II (diabète non-insulinodépendant mellitus). Le GLP-1 est sécrété par les cellules intestinales de type L, à partir du gène du préproglucagon. Cependant, il est rapidement dégradé dans la circulation par des enzymes protéolytiques, particulièrement par une endopeptidase, la dipeptidyl peptidase IV (DP IV), qui l'inactive complètement. Par conséquent, l'utilisation thérapeutique du GLP-1 est limitée. L'exendin-4, un agoniste du récepteur du GLP-1, est sécrété par les glandes salivaires du lézard Gila Monster et possède un potentiel biologique supérieur au GLP-1 grâce à sa stabilité accrue en circulation. Une plate-forme technologique telle la conjugaison à l'albumine (DAC™ et PC-DAC™) pourrait améliorer le profil pharmacodynamique et pharmacocinétique de ces molécules thérapeutiques natives en augmentant leur stabilité face à la dégradation enzymatique et en diminuant le potentiel immunogénique de molécules exogènes, tel l'exendin-4. La présente étude vise donc à mieux comprendre, à analyser et à évaluer le pouvoir de protection que la conjugaison à l'albumine confère aux peptides hormonaux et, plus spécialement, à l'exendin-4, afin de mettre au point un agent thérapeutique plus puissant et plus stable qui servirait à traiter le diabète de type 2. Une série d'analogues du GLP-1 et de l'exendin-4 ont été synthétisés sous forme de DAC™ et les dérivés résultants ont été bioconjugués in vivo ou in vitro à la cystéine en position 34 de l'albumine, soit de rat (RSA) ou humaine (HSA). L'expérimentation in vivo chez la souris diabétique a permis d'évaluer le potentiel insulinotropique des différents dérivés à l'étude. L'activité biologique et la stabilité des DAC™ de l'exendin-4 lorsque bioconjugués in vivo sont de beaucoup supérieures à l'exendin-4 native et l'effet peut être observé jusqu'à 24 heures suivant le test oral de tolérance au glucose. Le profil pharmacocinétique démontre bien cette stabilité conférée par la conjugaison à l'albumine. Lorsque les peptides DAC™ sont conjugués in vitro à l'albumine, le potentiel insulinotropique est de beaucoup supérieur à celui des DAC™ seuls et des molécules natives évidemment. L'évaluation de l'immunogénicité de l'exendin-4 chez le rat Sprague Dawley a permis de démontrer que la conjugaison à l'albumine de rat diminuait le potentiel immunogénique de cette molécule lors de la phase thérapeutique et de la première phase d'immunisation. Ces résultats tendent donc à démontrer l'efficacité de la conjugaison à l'albumine de manière in vitro, plus que in vivo afin d'augmenter l'activité biologique et la stabilité en circulation des molécules thérapeutiques natives. La poursuite de cette étude dans le but de mieux comprendre le mécanisme et les propriétés de la conjugaison à l'albumine devrait permettre de mettre au point non seulement un agent thérapeutique efficace pour traiter le diabète de type 2, mais aussi de mettre au point plusieurs autres agents thérapeutiques qui pourraient profiter de cette technologie. ______________________________________________________________________________ MOTS-CLÉS DE L’AUTEUR : diabète, exendin-4, GLP-1, albumine, conjugaison.

Type: Thèse ou essai doctoral accepté ()
Informations complémentaires: La thèse a été numérisée telle que transmise par l'auteur.
Directeur de thèse: St-Pierre, Serge
Mots-clés ou Sujets: Diabète / Albumine / Glucagon-like peptide-1 / Bioconjugaison
Unité d'appartenance: Faculté des sciences > Département de chimie
Faculté des sciences > Département des sciences biologiques
Déposé par: Service des bibliothèques
Date de dépôt: 21 sept. 2017 07:53
Dernière modification: 21 sept. 2017 07:53
Adresse URL : http://archipel.uqam.ca/id/eprint/10057

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