Les paralogues RPS18A et RPS18B de la levure Saccharomyces cerevisiae

Servant, Frédérique (2026). « Les paralogues RPS18A et RPS18B de la levure Saccharomyces cerevisiae » Mémoire. Montréal (Québec, Canada), Université du Québec à Montréal, Maîtrise en biochimie.

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Résumé

Les ribosomes eucaryotes sont structurellement hétérogènes. Notamment, la composition en protéines ribosomiques varie d’un ribosome à l’autre. Cette diversité a conduit à l’hypothèse que des « ribosomes spécialisés » sont capables de traduire préférentiellement certains sous-ensembles d’ARNm. La levure Saccharomyces cerevisiae est un excellent modèle pour explorer cette hétérogénéité, car la plupart de ses protéines ribosomiques sont encodées par des gènes dupliqués. Parmi ceux-ci, les paralogues RPS18A et RPS18B codent pour la protéine universellement conservée uS13. Bien que leurs séquences nucléotidiques diffèrent (promoteurs, introns, 3’UTR), les protéines uS13a et uS13b qu’ils produisent ont des séquences en acides aminés identiques. Toutefois, la délétion de RPS18A entraîne des défauts de croissance et des déséquilibres dans le ratio des sous-unités ribosomiques plus sévères que celle de RPS18B, suggérant des fonctions distinctes. Pour distinguer uS13a et uS13b, nous avons inséré des séquences encodant les épitopes HA et Myc dans RPS18A et RPS18B, respectivement. Les protéines HA-uS13a et Myc-uS13b marquées ont été exprimées à partir de plasmides. La fonctionnalité des protéines recombinantes a été confirmée par complémentation d’une souche délétée pour les deux gènes. La complémentation a été réalisée avec des plasmides centromériques (simple copie) ou 2 microns (multicopies) pour contrôler le dosage génique de HA-RPS18A et de MYC-RPS18B. L’analyse de l’abondance des pré-ARNm et ARNm épissés suggère que RPS18A est régulé au niveau transcriptionnel, tandis que RPS18B serait régulé à l’étape de l’épissage. Les outils moléculaires créés pour ces travaux permettront éventuellement de réaliser des analyses complémentaires telles que l’immunoprécipitation des protéines HA-uS13a et Myc-uS13b et le profilage des ribosomes qui contiennent l’une ou l’autre de ces protéines. _____________________________________________________________________________ MOTS-CLÉS DE L’AUTEUR : Protéines ribosomiques, paralogues, ribosomes spécialisés, Saccharomyces cerevisiae

Type:	Mémoire accepté
Informations complémentaires:	Fichier numérique reçu en format PDF.
Directeur de thèse:	Dragon, François
Mots-clés ou Sujets:	Protéines ribosomiques / Ribosomes / Gènes paralogues / Saccharomyces cerevisiæ
Unité d'appartenance:	Faculté des sciences > Département de chimie Faculté des sciences > Département des sciences biologiques
Déposé par:	Service des bibliothèques
Date de dépôt:	04 sept. 2026 12:59
Dernière modification:	04 sept. 2026 12:59
Adresse URL :	https://archipel.uqam.ca/secure/id/eprint/20288

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