Development of thymic regulatory T cells during human immunodeficiency virus (HIV) infection

Swaminathan, Sharada (2019). « Development of thymic regulatory T cells during human immunodeficiency virus (HIV) infection » Mémoire. Montréal (Québec, Canada), Université du Québec à Montréal, Maîtrise en biochimie.

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Résumé

Contexte : Les lymphocytes T régulateurs (Treg) sont des cellules immunosuppressives ayant deux origines développementales: thymiques ou périphérique. FoxP3, le facteur de transcription principal des Tregs, contrôle leur différenciation et leurs fonctions suppressives. L'expression de FoxP3 par les cellules Tregs thymiques est en partie régulée par la cytokine anti-inflammatoire TGF-β, qui contribue également au développement des Tregs dans le sang périphérique et les tissus lymphoïdes. Les personnes vivant avec une infection chronique par le virus de l'immunodéficience humaine (VIH) ont une fréquence plus élevée de Tregs dans le sang périphérique et les tissus lymphoïdes. La fibrose des tissus lymphoïdes induite par le TGF-β chez les individus infectés par le VIH est associée à la progression de la maladie. Malgré la corrélation entre TGF-β et la pathologie associée au VIH, le rôle du TGF-β dans l'induction et le maintien des Tregs dans le thymus pendant l'infection par le VIH demeure incertain. Hypothèse : Le TGF-β induit l'expression de FoxP3 et contribue ainsi à l'augmentation de la fréquence des Tregs thymiques au cours de l'infection par le VIH. Objectif : Étudier les modifications sur l'expression de FoxP3 et la génération de Treg thymiques après traitement par le TGF-β lors d'une infection in vitro de thymocytes humains par le VIH-1. Méthodes : Des tissus thymiques humains frais ont été obtenus chez des patients pédiatriques subissant des chirurgies cardiaques correctives. La caractérisation phénotypique des thymocytes a été réalisée ex vivo par cytométrie en flux. L'évaluation ex vivo du statut épigénétique de foxp3 a été réalisée à l'aide de MiSeq. L'infection virale par les souches VIH-1 tropiques R5 et X4, ainsi que le traitement par le TGF-β de thymocytes humains ont été réalisés dans un modèle de co-culture in vitro avec des lignées cellules OP9-DL1 exprimant le ligand de Notch. Résultats : La caractérisation phénotypique ex vivo des thymocytes a révélé les faits suivants: 1) Quatre-vingt-dix-neuf % des thymocytes CD4+ FoxP3+ expriment Helios, un marqueur controversé des Tregs thymiques. 2) Le facteur de transcription maître des cellules Th17, RORyt, n'est pas co-exprimé avec FoxP3 dans les cellules T CD4 thymiques, ce qui indique que l'expression dans le thymus est associée à la maturation des thymocytes plutôt qu'à la différenciation de Th17. 3) Plus de 51% des Treg et des CD4+ FoxP3- non-Tregs dans le thymus expriment CD45RO, indiquant que ces cellules pourraient avoir reçu une forte stimulation du TCR par des auto-antigènes et ont probablement subi une sélection négative. 4) Environ 3% des Treg exprimaient le marqueur inflammatoire CCR6 et 2% les marqueurs de référence intestinaux Integrin-β7 et CCR9, suggérant leur repositionnement dans le thymus. 5) Plus de 87% des Tregs expriment le corécepteur du VIH CXCR4, et les Tregs expriment un niveau plus élevé de CCR5 (18,53%) par rapport aux non-Tregs (1,01%), ce qui suggère que les Tregs sont potentiellement plus susceptibles à l'infection par le VIH. 6) Les thymocytes CD3haut ont la plus haute expression de FoxP3 et une déméthylation de la région CNS1 régulant foxp3. Comme prévu, le traitement des thymocytes par le TGF-β induit l'expression de CD127 et entraîne une augmentation des fréquences de Tregs. L'infection des thymocytes par les souches VIH tropiques R5 et X4 a montré que les thymocytes FoxP3+ sont moins susceptibles à l'infection que les thymocytes FoxP3-. Le traitement par le TGF-β n'a eu aucun effet sur le taux d'infection par le VIH. Lors de l'infection par le VIH et du traitement par le TGF-β, aucune augmentation de l'expression de FoxP3 ou des fréquences de Tregs n'a été observée. Conclusions : La caractérisation phénotypique ex vivo des Tregs thymiques a fourni un aperçu complet des propriétés des Tregs thymiques. L'infection in vitro par le VIH et le traitement par le TGF-β de thymocytes humains n'ont pas d'impact sur l'expression de FoxP3 et les fréquences de Tregs. _____________________________________________________________________________ MOTS-CLÉS DE L’AUTEUR : Tregs, caractérisation phénotypique, TGF-β, l'infection par le VIH, statut épigénétique de foxp3

Type: Mémoire accepté
Informations complémentaires: Le mémoire a été numérisé tel que transmis par l'auteur.
Directeur de thèse: Jenabian, Mohammad-Ali
Mots-clés ou Sujets: Lymphocytes T / Thymus / Facteurs de croissance transformants bêta / Protéines FOXP3 / Infections à VIH
Unité d'appartenance: Faculté des sciences > Département de chimie
Faculté des sciences > Département des sciences biologiques
Déposé par: Service des bibliothèques
Date de dépôt: 02 mars 2020 11:29
Dernière modification: 02 mars 2020 11:29
Adresse URL : http://archipel.uqam.ca/id/eprint/13286

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